New monoclonal antibodies against bilitranslocase as a diagnostic tool in determining the progress of clear cell renal cell carcinoma

摘要

Uvod: Monoklonska protitelesa (mAbs) so pomembno orodje v diagnostiki in raziskovanju, ?e posebej kadar obravnavamo proteinski ozna?evalec neznane primarne strukture, kot je v primeru bilitranslokaze (BTL). BTL se izra?a tudi na celicah ledvic, kjer deluje kot prena?alec organskih anionov. V prej?njih ?tudijah smo ugotovili, da se bilitranslokaza izra?a razli?no v normalnih ledvi?nih celicah v primerjavi z zgodnjimi fazami ledvi?nega raka. Metode: Razvili smo monoklonska protitelesa proti zunaj- in znotrajceli?nim domenam proteinskega modela bilitranslokaze. Da bi pridobili globlji vpogled v izra?anje bilitranslokaze tudi v klini?nih vzorcih, smo ugotavljali izra?anje bilitranslokaze tudi pri razli?nih gradusih svetloceli?nega karcinoma ledvi?nih celic (ccRCC). Izsledki: Obe novi monoklonski protitelesi se ve?eta na protein v celicah UOK171, ne pa tudi v negativnih kontrolah. mAb, ki ga proizvaja celi?na linija 2A9/2E9 (peptid 298–310; znotrajceli?na domena), je bolj primeren za imunohistokemijske preiskave, ker daje ve?jo intenziteto vezave kot mAb, ki ga proizvaja linija 11C9/2G9 (peptid 235–246; zunajceli?na domena). Protitelo 2A9/2E9 obarva bilitranslokazo v proksimalnih ledvi?nih tubulih, ne pa v okoli?ki stromi. Obarvanje se zmanj?uje v gradusu I v primerjavi z normalno ledvico, postopno naraste v gradusih II in III ter ponovno pade v gradusu IV ccRCC. Sklepi: Na?i rezultati ka?ejo na to, da se lahko ta protitelesa uporabijo pri razli?nih imunskih testih. Poleg tega sta nam specif?nost in afniteta na?ih mAb omogo?ila njihovo uporabo pri analizi napredovalih gradusov svetloceli?nega karcinoma ledvi?nih celic pri omejenem ?tevilu bolnikov. mAb, razvita v tej ?tudiji, se lahko uporabijo kot diagnosti?no orodje za razlikovanje med zgodnjimi in poznimi gradusi svetloceli?nega carcinoma ledvi?nih celic.