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【24h】

Padroniza??o da técnica de imuno-histoquímica para raiva em amostras de tecido do sistema nervoso central de bovinos fixadas em formol e emblocadas em parafina

机译:牛中枢神经系统组织样本中狂犬病狂犬病的免疫组织化学技术标准化,固定在福尔马林中并包埋在石蜡中

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摘要

Para a padroniza??o da técnica de imuno-histoquímica para raiva foram utilizadas cinco amostras de SNC de bovinos infectados naturalmente com o vírus da raiva usando-se um anticorpo policlonal e dois monoclonais. Para a recupera??o antigênica foram avaliados os seguintes reagentes: protease XIV, proteinase K e tamp?o citrato pH 6,0 mantido a 100oC por 15 minutos. A detec??o de antígeno rábico nas amostras foi possível com os três anticorpos utilizados. O anticorpo policlonal foi superior aos anticorpos monoclonais, demonstrando bons resultados com os três protocolos de recupera??o antigênica, obtendo uma maior intensidade de marca??o quando utilizado o tamp?o citrato e calor. A técnica de imuno-histoquímica demonstrou a presen?a do antígeno viral no citoplasma de neur?nios na forma de agregados de granulos ou de forma redonda ou oval, mostrando cor púsculo de inclus?o viral único a múltiplos nos neur?nios. A imuno-histoquímica é um método rápido, podendo ser usada na rotina em casos onde inicialmente há suspeita de raiva, especialmente em casos onde fragmentos de cérebro submetidos ao laboratório foram fixados em formol, onde as amostras n?o podem ser enviadas ao laboratório imediatamente e para a realiza??o de estudos retrospectivos.
机译:为了使狂犬病的免疫组织化学技术标准化,使用了多克隆抗体和两种单克隆抗体,从自然感染了狂犬病病毒的牛中提取了五个CNS样品。为了进行抗原回收,评估了以下试剂:蛋白酶XIV,蛋白酶K和pH 6.0的柠檬酸盐缓冲液(在100oC下保持15分钟)。使用三种抗体可以检测样品中的狂犬病抗原。多克隆抗体优于单克隆抗体,在三种抗原回收方案中均显示出良好的结果,当使用柠檬酸盐和热缓冲液时,染色强度更高。免疫组织化学技术证明病毒抗原以颗粒聚集体或圆形或椭圆形的形式存在于神经元细胞质中,在多个神经元中显示出一种单一的病毒包涵颜色。免疫组织化学是一种快速的方法,可在最初怀疑有狂犬病的情况下常规使用,尤其是在将提交给实验室的脑碎片固定在甲醛中而无法将样品立即送往实验室的情况下。并进行回顾性研究。

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