狂犬病的实验室诊断在临床狂犬病诊断中应用的研究

摘要

目的：狂犬病（rabies）是由狂犬病病毒（rabies vlrus）所致的以中枢神经系统感染为特征的急性人畜共患烈性传染病。是迄今为止人类病死率最高的急性传染病，一旦发病病死率几乎为100%。据世界卫生组织调查，全球每年死于狂犬病的患者约有40，000-50，000，其中99%以上发生在发展中国家，亚洲、非洲和拉丁美洲是狂犬病的主要疫源地，我国的狂犬病发病数仅次于印度，居世界第二位。狂犬病病毒为嗜神经病毒，主要破坏中枢神经系统，因此，狂犬病的临床表现多样，单靠流行病学及临床表现诊断狂犬病容易造成误诊和漏诊。世界卫生组织提出只有实验室诊断才能确诊狂犬病。狂犬病实验室诊断方法包括抗原检测，抗体检测，基因诊断及组织病理学检查。本文通过对我院实验室确诊的狂犬病患者实验结果的分析，探讨狂犬病实验室诊断在临床狂犬病诊断中的应用，为狂犬病诊断方法在临床的应用提供借鉴。 方法：45例狂犬病患者均为1984年6月～2008年12月本院收治的住院患者，犬只唾液标本来自四川省狂犬病预防与控制办公室2007年～2008年进行犬只狂犬病带毒情况流行病学调查所采集的唾液标本共1350份。脑组织及脑脊液病毒抗原检测诊断试剂盒为法国Pasteur研究所提供的快速狂犬病酶联免疫诊断试剂（Rapid Rabies Enzyme Immuno-Diagnosis，RREID），血清及脑脊液抗体检测试剂盒为法国Pasteur研究所提供的Platelia狂犬病诊断药盒，检测方法及结果判断按说明书进行，所有试剂均在有效期内使用。病理组织学检查：病理组织学检查均在患者死亡后6小时内进行，在脑组织不同部位取样，切片，观察脑组织的病理改变，特别是用锡勒（Seller）染色法在神经细胞内查到内基小体。资料分析采用计数资料的X2检验，当T<1时，采用fisher确切概率法（fisher's exact probabilities in2×2 tables），用SPSS14．0统计软件包统计分析检测结果，P<0．05认为差异有统计学意义，P>0．05认为差异无统计学意义。 结果：狂犬病患者脑组织抗原检测阳性率100%，脑脊液抗原检测阳性率为50%，犬只唾液带毒率5．11%。血清中和抗体检测总阳性率为97．62%，前驱期和兴奋期为40．48%，麻痹期为94．44%，兴奋期和麻痹期中和抗体阳性率差异有统计学意义（经fisher确切概率法检验，P<0．05），同一患者同时期血清及脑脊液中和抗体阳性率差异无统计学意义（经fisher确切概率法检验，P>0．05）。内基小体的检出率为57．14%。 结论：由于标本原因，抗原检测在狂犬病早期诊断中的应用受到局限，狂犬病生存期诊断非常困难。对于已发病患者，中和抗体对阻止病情发展并没有作用，只能作为狂犬病特异性诊断依据之一。中和抗体在血清及脑脊液中分布无差异，对于免疫后发病患者可通过脑脊液检测中和抗体来诊断。内基小体在狂犬病回顾性诊断中具有重要意义，但需排除假阳性和假阴性。几种狂犬病诊断方法联合应用可提高诊断率。

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综述 狂犬病诊断及防治进展