Histologic evaluation of pathologic changes in gastrocnemius muscle in the model of rodent hindlimb ischemia

摘要

Цель. Разработка модели ишемии задних конечностей у крыс для оценки эффективности генной и клеточной терапии. Методы. На первом этапе производили лигирование наружной подвздошной артерии сразу после бифуркации общей подвздошной артерии. Затем бедренную артерию лигировали до её разветвления на нисходящую коленную, подколенную и подкожную артерии, после этого следовало рассечение артерии между лигатурами. Второй этап выполняли через 7 дней после первого: ветви подколенной артерии к икроножной мышце и сформировавшиеся коллатерали лигировали и иссекали. Кровоток в конечности оценивали при помощи лазерной допплеровской флоуметрии. Животных выводили из эксперимента на 14-е, 17-е, 21-е, 28-е, 35-е и 42-е сутки после первого этапа. Парафиновые срезы икроножной мышцы окрашивали по Маллори и с антителами к CD34. Результаты. Патогистологический анализ показал продолжительную ишемию оперированной конечности без восстановления нативной структуры скелетных мышц и значительный интерстициальный фиброз (11,89±5,53% против 2,55±2,13% в интактной конечности к 42-му дню, р 0,05). При этом в оперированной конечности наблюдались полиморфные мышечные волокна значительно меньшего диаметра, а также снижение капиллярной плотности (0,82±0,03 против 1,91±0,06 в интактной конечности на 42-й день, р 0,05). По данным лазерной допплеровской флоуметрии выявлено снижение кровотока в оперированной конечности (0,67±0,22 от уровня кровотока интактной конечности на 42-й день). Вывод. Разработанная нами двухэтапная модель ишемии задних конечностей у крыс приводит к гистологическим изменениям в скелетных мышцах, типичным для такой патологии у человека.