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【24h】

Linea celular de Aedes aegypti (Diptera Culicidae) AEGY-28 refractaria a la infección con los virus dengue 2 y fiebre amarilla

机译:埃及伊蚊(Diptera Culicidae)AEGY-28细胞株对登革2型和黄热病病毒的感染均具有耐药性

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摘要

Los cultivos celulares de mosquitos son frecuentemente utilizados para el aislamiento, identificación y caracterización de arbovirus. Para el estudio de los virus dengue (VDEN) y virus de fiebre amarilla (VFA) se emplean, principalmente, la línea celular C6/36 de Aedes albopictus y la línea celular AP-61, obtenida de Aedes pseudoscutellaris. La línea celular de A. aegypti AEGY-28, previamente obtenida a partir de tejidos embrionarios del vector, se utilizó en el presente trabajo para evaluar la susceptibilidad a la infección por VDEN y VFA. Para ello, los cultivos celulares se ensayaron a diferente multiplicidad de infección con los aislados clínicos de virus dengue tipo 2 (COL-789, MOI: 1 y 5) y VFA (V-341, MOI 0,02). Posteriormente se realizó la detección de antígenos virales por la técnica de inmunocitoquímica y su cuantificación por la técnica de Cell-ELISA fluorométrica. Se usaron como controles positivos de infección, tanto células C6/36 como células VERO. Inesperadamente, no se observó inmunoreactividaden las células de A. aegypti infectadas con ambos tipos de virus en ninguno de los MOI o tiempos estudiados. Tampoco se evidenció antígeno por la técnica fluorométrica ni fue posible detectar RNA viral por RT-PCR a partir de células infectadas.Por lo tanto, se puede concluir que la línea celular de A. aegypti no es susceptible a la infección por VDEN ni por VFA. Ello podría estar relacionado con características propias de la membrana celular o de la maquinaria enzimática necesaria para la replicación viral.
机译:蚊细胞培养物经常用于虫媒病毒的分离,鉴定和表征。为了研究登革热病毒(VDEN)和黄热病病毒(VFA),使用了来自白纹伊蚊的C6 / 36细胞系和从白纹伊蚊获得的AP-61细胞系。以前从胚胎载体组织中获得的埃及伊蚊AEGY-28细胞系在本工作中用于评估VDEN和VFA对感染的易感性。为此,用2型登革病毒临床分离株(COL-789,MOI:1和5)和VFA(V-341,MOI 0.02)在不同的感染复数下测试细胞培养物。随后,通过免疫细胞化学技术进行病毒抗原的检测,并通过荧光细胞ELISA技术进行定量。 C6 / 36细胞和VERO细胞均用作阳性感染对照。出乎意料的是,在所研究的任何MOI或任何时间,在感染两种病毒的埃及伊蚊中均未观察到免疫反应性。荧光技术既不能证明抗原,也不能通过RT-PCR从被感染的细胞中检测病毒RNA;因此,可以得出结论,埃及埃及曲霉细胞系不易受VDEN或VFA感染。这可能与细胞膜的特性或病毒复制所必需的酶机制有关。

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