Comparison of folic acid uptake characteristics by human placental choriocarcinoma cells at acidic and physiological pH

摘要

The aim of this work was to characterize the placental uptake of folic acid from the maternal circulation. Using 2 human trophoblast cell lines (BeWo and JAR), we verified that uptake of 3H-folic acid was pH-dependent, increasing significantly with decreasing extracellular pH. In BeWo cells, uptake of 3H-folic acid at pH5.5 was (i) Na+-independent; (ii) inhibited by folic acid, 5-methyltetrahydrofolate (5-MTHF), and methotrexate (MTX); (iii) inhibited by the anion transport inhibitors 4,4′-diisothiocyanatostilbene-2,2′-disulphonic acid (DIDS) and 4-acetamido-4′-isothiocyano-2,2′-disulfonic acid stilbene (SITS); (iv) inhibited by the proton ionophore carbonyl cyanide 4-(trifluoromethoxy)phenylhydrazone (FCCP); (v)not inhibited by blockers of receptor-mediated endocytosis (cytochalasin D and monensin); (vi) trans-inhibited by MTX and folic acid; and (vii) not affected by an anti-reduced folate transporter-1 (RFC) antibody. At pH7.5, uptake of 3H-folic acid was (i) Na+-independent; (ii) inhibited by folic acid and MTX, but not by 5-MTHF; (iii) inhibited by SITS, but not by DIDS; (iv)not affected by FCCP; (v) inhibited by monensin (but not by cytochalasin D); (vi) trans-inhibited by folic acid (but not by MTX); and (vii) inhibited by an anti-RFC antibody. In conclusion, in BeWo cells, both RFC and receptor-mediated endocytosis seem to be involved in 3H-folic acid uptake at pH7.5, whereas at pH5.5, RFC and (or) a low pH-operating transporter distinct from RFC are involved.Le présent travail a eu pour but de caractériser la capture placentaire d'acide folique à partir de la circulation maternelle. Nous avons utilisé deux lignées de cellules trophoblastiques humaines (BeWo et JAR) pour vérifier que la capture d'acide 3H-folique est dépendante du pH, augmentant significativement avec la diminution du pH extracellulaire. Dans les cellules BeWo, la capture d'acide 3H-folique à un pH 5,5 a été: (i) indépendante du Na+; (ii) inhibée par l'acide folique, le 5 méthyltétrahydrofolate (5-MTHF) et le méthotrexate (MTX); (iii) inhibée par les inhibiteurs de transport anionique, acide 4,4′-diisothiocyanatostilbène-2,2′-disulfonique (DIDS) et acide 4-acétamido-4′-isothiocyano stilbène- 2,2′-disulfonique (SITS); (iv) inhibée par l'ionophore protonique carbonyl cyanure 4-(trifluorométhoxy)phénylhydrazone (FCCP); (v) non inhibée par les bloqueurs de l'endocytose véhiculée par un récepteur (cytochalasine D et monensine); (vi) trans-inhibée par MTX et l'acide folique; et (vii) non affectée par un anticorps anti-transporteur-1 de folate réduit (RCF). À un pH 7,5, la capture d'acide 3H-folique a été: (i) indépendante du Na+; (ii) inhibée par l'acide folique et MTX, mais pas par 5-MTHF; (iii) inhibée par SITS, mais pas par DIDS; (iv) non affectée par FCCP; (v) inhibée par la monensine (mais pas par la cytochalasine D); (vi) trans-inhibée par l'acide folique (mais pas par MTX); et (vii) inhibée par un anticorps anti-RFC. En conclusion, dans les cellules BeWo, le RCF et l'endocytose véhiculée par un récepteur semblent jouer un rôle dans la capture d'acide 3H-folique à un pH 7,5, tandis qu'à un pH 5,5, le RFC et (ou) un transporteur fonctionnant à un pH faible distinct de RFC participent à la capture.