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Protocol for visualizing newly synthesized proteins in primary mouse hepatocytes

机译:用于在原发生小鼠肝细胞中可视化新合成蛋白的方案

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摘要

Selective identification of newly synthesized proteins is challenging because all proteins, both existing and nascent, have the same amino acid pool and are therefore chemically indistinguishable. L-homopropargylglycine is an amino acid analog of methionine containing an alkyne moiety that can undergo a classic click chemical reaction with azide containing Alexa Fluor. Here, we present an integrated tool based on immunofluorescence staining to accurately trace and localize the newly synthesized protein in isolated primary mouse hepatocytes.
机译:新合成的蛋白质的选择性鉴定是挑战性的,因为所有现有和新生的蛋白质都具有相同的氨基酸库,因此化学难以区分。 L-同源丙氨酸是甲硫氨酸的氨基酸类似物,其含有炔烃部分,可与含叠氮化物的含叠氮化物进行经典咔哒药物。在这里,我们介绍了一种基于免疫荧光染色的综合工具,以精确地迹线并定位在分离的原发性小鼠肝细胞中的新合成蛋白质。

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