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Isolation of rare transcripts by representational difference analysis.

机译:通过代表性差异分析分离稀有成绩单。

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摘要

Representational difference analysis (RDA) is a powerful technique for cloning the differences between genomes, and has recently been adapted for cloning differentially expressed genes. RDA, like other PCR-based differential screening methods, is prone to the production of false positives. We have identified a major source of false positives in RDA of cDNA and have introduced improvements which minimise their production. These modifications also significantly increase sensitivity, allowing for the isolation of rare differential transcripts from nanogram amounts of mRNA.
机译:代表性差异分析(RDA)是一种用于克隆基因组之间差异的强大技术,最近已被用于克隆差异表达的基因。像其他基于PCR的差异筛选方法一样,RDA容易产生假阳性。我们已经确定了cDNA RDA中假阳性的主要来源,并已进行了改进,可最大程度地减少其产生。这些修饰也显着提高了灵敏度,从而可以从纳克量的mRNA中分离出稀有的差异转录本。

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