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AHT-ChIP-seq: a completely automated robotic protocol for high-throughput chromatin immunoprecipitation

机译:AHT-ChIP-seq:用于高通量染色质免疫沉淀的全自动机器人方案

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摘要

ChIP-seq is an established manually-performed method for identifying DNA-protein interactions genome-wide. Here, we describe a protocol for automated high-throughput (AHT) ChIP-seq. To demonstrate the quality of data obtained using AHT-ChIP-seq, we applied it to five proteins in mouse livers using a single 96-well plate, demonstrating an extremely high degree of qualitative and quantitative reproducibility among biological and technical replicates. We estimated the optimum and minimum recommended cell numbers required to perform AHT-ChIP-seq by running an additional plate using HepG2 and MCF7 cells. With this protocol, commercially available robotics can perform four hundred experiments in five days.
机译:ChIP-seq是一种已建立的手动执行的方法,用于在全基因组范围内识别DNA-蛋白质相互作用。在这里,我们描述了自动高通量(AHT)ChIP-seq的协议。为了证明使用AHT-ChIP-seq获得的数据的质量,我们使用单个96孔板将其应用于小鼠肝脏中的五种蛋白质,证明了生物学和技术复制品具有极高的定性和定量重现性。我们通过使用HepG2和MCF7细胞运行另一块板,估计了执行AHT-ChIP-seq所需的最佳和最小推荐细胞数。使用此协议,市售的机器人技术可以在五天内执行四百次实验。

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