雷公藤红素增强TNF-α对膀胱癌细胞系T24凋亡诱导效应及机制研究

摘要

目的 研究雷公藤红素是否能增强TNF-α对膀胱癌细胞的杀伤活性及机制.方法 用MTT法及AnnexinⅤ染色法检测TNF-α单独治疗及联合雷公藤红素治疗对膀胱癌细胞系T24细胞活力及凋亡的影响.将T24细胞用雷公藤红素和TNF-α处理后,用免疫共沉淀及Western blot方法检测RIP1蛋白与FADD及caspase-8的相互作用.雷公藤红素和TNF-α处理后,用Western blot方法检测T24细胞cIAP1的表达水平.用Lipofectamine 2000试剂将cIAP1表达质粒转染入T24细胞,再用MTT法、AnnexinⅤ染色法、免疫共沉淀及Western blot方法检测雷公藤红素联合TNF-α对T24细胞凋亡通路的影响.结果 雷公藤红素能显著增强低浓度TNF-α对T24细胞的杀伤活性和凋亡诱导活性,并增强TNF-α对RIP1的活化,增加RIP1-FADD-caspase-8复合物的形成.雷公藤红素能显著下调T24细胞cIAP1的表达水平,转染cIAP1表达质粒后,雷公藤红素对TNF-α的凋亡促进作用丧失.结论 雷公藤红素通过抑制cIAP1的表达增强TNF-α对膀胱癌细胞系T24的凋亡诱导效应.