长链非编码RNAAC003973.4对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响研究

摘要

目的 检测长链非编码RNA AC003973.4在人乳腺癌组织和乳腺癌细胞株中的表达,探讨其对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制.方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测20例乳腺癌组织及配对的癌旁组织,以及检测乳腺癌细胞株(BT-549、MDA-MB-231、MCF-7、T47D)和正常乳腺上皮细胞株MCF-10A中AC003973.4的表达.取AC003973.4表达水平最低的乳腺癌细胞株转染过表达质粒以上调AC003973.4的表达,分别采用MTS法、Transwell迁移和侵袭实验检测AC003973.4对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响;生物信息学法预测AC003973.4互补结合的miRNA及下游靶基因,qRT-PCR法检测miRNA和下游靶基因mRNA的表达,Western blot检测相关蛋白的表达.结果 乳腺癌组织AC003973.4表达水平明显低于癌旁组织(P<0.01).乳腺癌细胞株AC003973.4表达水平明显低于人正常乳腺上皮细胞(均P<0.05),MCF-7细胞中AC003973.4的表达水平最低(P<0.01).上调MCF-7细胞AC003973.4的表达后,细胞增殖、迁移和侵袭能力均明显减弱(均P<0.05).AC003973.4可互补结合miR-224-5p,miR-224-5p可互补结合PTEN.上调MCF-7细胞AC003973.4的表达后,miR-224-5p的表达均下调(P<0.01),PTEN mRNA和蛋白的表达均上调(均P<0.01),细胞增殖相关蛋白CDK4、Cyclin D1与细胞迁移相关蛋白Zeb-1、N-cadherin表达均下调(均P<0.01).结论 乳腺癌组织和细胞株中AC003973.4表达水平降低,上调AC003973.4表达可减弱乳腺癌MCF-7细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其作用机制可能与调节miR-224-5p与PTEN基因的表达有关.