葛根素对糖尿病心肌病大鼠内质网应激的影响

摘要

目的检测内质网应激通路相关分子葡萄糖调节蛋白78(Grp78)及 Grp94在糖尿病心肌病大鼠表达的变化,探讨内质网应激在糖尿病心肌病的作用及葛根素的干预作用及其机制.方法50只 Wistar 大鼠随机分为正常对照组(C 组)10只；另40只予高脂高糖饲养4周后腹腔注射链脲佐菌素(STZ)35mg/kg×4周,制备并选取糖尿病大鼠模型20只,再随机分为糖尿病模型组(M 组)及葛根素给药组[T 组,80mg/(kg·d)给药6周],每组10只.分批处死,20周龄大鼠取血测空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)及计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)；测大鼠心肌组织检测肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)活力；心肌组织 HE 染色,琼脂糖凝胶电泳法检测DNA 梯形条带,免疫组化法检测 Grp78及 Grp94蛋白表达变化,RT-PCR 测定 Grp78、Grp94mRNA 的表达.结果 M 组、T 组FBG、FINS 和 HOMA-IR 及 CK、LDH 均高于 C 组(均 P<0.05),T 组 FBG、HOMA-IR 及 CK、LDH 较 M 组下降(均 P<0.05).M 组心肌纤维肥大,走形较为紊乱,出现核固缩、裂解及丢失现象,心肌细胞变性、坏死,横纹肌消失；T 组心肌纤维轻度肥大,微血管的管壁、管腔均正常.M 组和 T 组均出现了 DNA 梯形图谱,T 组 DNA 梯状条带较 M 组条带不明显.M 组、T 组大鼠的 Grp78和 Grp94免疫组化阳性指数(IPI)、Grp78mRNA 和 Grp94mRNA 均高于 C 组(均 P<0.01),且 T 组的 Grp78-IPI 和 Grp78mRNA 均低于 M 组(均 P<0.01),而 T 组的 Grp94-IPI 和 Grp94mRNA 与 M 组差异无统计学意义(均 P >0.05).结论糖尿病时心肌细胞内质网应激蛋白Grp78、Grp94过强的表达可能参与了糖尿病心肌病的病变过程；葛根素能显著降低升高的血糖,保护受损的心肌,其机制可能是通过降低心肌内质网 Grp78的过强表达.糖尿病心肌病心肌内质网应激蛋白 Grp78可能是葛根素保护作用的靶点之一.