新型羟磷灰石涂层的聚乳酸支架体外细胞相容性研究

摘要

目的 研究新型的用固定化尿素酶的方法制备的羟基磷灰石/聚乳酸(HA/PLLA)复合材料的生物相容性和成骨活性.方法 将成骨样MG63细胞种植在HA/PLLA和PLLA(对照材料)三维支架材料上.在培养2,4和6天后通过改良的MTT法检测细胞在材料上的增殖情况;用pNPP磷酸酶检测试剂盒测定ALP含量来评估成骨样细胞在材料上的分化情况;在培养4天后用扫描电镜观察细胞在材料上的形貌变化;用RT-PCR检测磷酸酶(ALP),骨钙素(OC),1型胶原等基因变化情况.结果在培养2天和4天后,HA/PLLA材料上的细胞数量要明显多于PLLA材料组,说明相对于传统的PLLA材料,HA/PLLA材料更能促进成骨细胞的增殖.电镜结果提示,在培养4天后HA/PLLA材料上的MG63细胞铺展在材料孔壁表面,提示细胞具有良好的活力,而PLLA组的细胞表现为圆球形,未见明显的细胞伪足形成,其形态明显不及HA/PLLA材料组.ALP检测结果提示,HA/PLLA组的细胞具有更高的ALP活性.RT-PCT结果也提示,HA/PLLA组具有更高的ALP和OC基因表达,提示HA/PLLA材料更能促进成骨细胞的分化.结论 通过固定化尿素酶的方法制备的新型羟基磷灰石/聚乳酸材料相比传统的PLLA材料更能促进成骨细胞的增殖和分化,提示该材料是一种良好的骨组织工程支架材料.