温阳消癥方对单侧输尿管梗阻小鼠肾组织Ⅰ型与Ⅲ型胶原表达的影响

摘要

目的 观察单侧输尿管梗阻(UUO)模型小鼠肾组织Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)及Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)mRNA及蛋白表达,探讨温阳消癥方对肾间质纤维化的影响.方法 32只C57小鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、缬沙坦组、温阳消癥组,每组8只,后三组采用单侧输尿管结扎法制作肾间质纤维化模型.造模成功后缬沙坦组给予缬沙坦水悬液灌胃(浓度4.9g/mL,给药剂量16.5mg/kg);温阳消癥组给予温阳消癥方水煎剂灌胃(浓度4.9g/mL,给药剂量49g/kg),假手术组和模型组给予等量生理盐水灌胃,治疗14天后处死各组小鼠并留取左侧肾组织标本,采用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(Rt-qPCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测并分析Col-Ⅰ、Col-ⅢmRNA及蛋白表达情况.结果 模型组Col-Ⅰ、Col-ⅢmRNA及蛋白表达均较假手术组显著上调[Col-ⅠmRNA:(6.85±0.22)比(1.03±0.11);Col-ⅢmRNA:(6.21±0.19)比(1.09±0.14);Col-Ⅰ蛋白:(6.23±0.24)比(1.09±0.13);Col-Ⅲ蛋白:(16.99±0.13)比(1.01±0.07);P<0.01];温阳消癥组及缬沙坦组Col-Ⅰ、Col-ⅢmRNA及蛋白表达均较模型组显著下调[Col-ⅠmRNA:(1.27±0.13)、(2.65±0.25)比(6.85±0.22);Col-ⅢmRNA:(1.17±0.08)、(4.11±0.14)比(6.21±0.19);Col-Ⅰ蛋白:(3.14±0.15)、(5.18±0.22)比(6.23±0.24);Col-Ⅲ蛋白:(2.68±0.12)、(14.14±0.19)比(16.99±0.13);P<0.01];温阳消癥组的Col-I、Col-ⅢmRNA及蛋白表达与缬沙坦组比较均有显著下调[Col-ⅠmRNA:(1.27±0.13)比(2.65±0.25);Col-ⅢmRNA:(1.17±0.08)比(4.11±0.14);Col-Ⅰ蛋白:(3.14±0.15)比(5.18±0.22);Col-Ⅲ蛋白:(2.68±0.12)比(14.14±0.19);P<0.01].结论 温阳消癥方可下调Col-Ⅰ、Col-ⅢmRNA及蛋白表达,减少细胞外基质在肾间质的堆积,从而减轻UUO模型小鼠肾间质纤维化程度.