半夏泻心汤对DSS诱导的溃疡性结肠炎小鼠肠道微生态及Th17/Treg细胞平衡的影响

摘要

目的观察半夏泻心汤对饮用葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导建立的溃疡性结肠炎(UC)模型小鼠Th17/Treg细胞平衡及肠道微生态的影响,从免疫失衡及菌群紊乱角度分析半夏泻心汤治疗UC的作用机制。方法将40只C57BL/6J雄性小鼠随机分为空白组、模型组、阳性药(美沙拉嗪)组及半夏泻心汤组,除空白组外的各小鼠采用2.5%DSS水溶液自由饮用7天诱导建立UC小鼠模型。自实验第8日起,分别采用灭菌水、美沙拉嗪水溶液、半夏泻心汤水溶液给上述各组别小鼠灌胃。采用HE染色观察结肠组织病理学变化,ELISA方法检测组织炎症因子含量,流式细胞术检测Th17及Treg细胞的相对数量,16S rRNA测序技术进一步检测模型小鼠粪便中菌群的变化。结果与空白组比较,模型组小鼠结肠损伤严重,血清炎症因子含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,中药干预组小鼠结肠损伤减轻,血清TNF-α、IFN-γ含量显著下降(P<0.05)。较空白组小鼠相比,模型组小鼠Th17细胞百分比显著升高(P<0.01),而Treg细胞百分比显著降低(P<0.01)。经半夏泻心汤干预后,其小鼠Th17细胞数量均显著降低(P<0.05),Treg细胞数量则显著升高(P<0.05)。同时,半夏泻心汤可升高门水平上Firmicutes、属水平上Lachnospiraceae_NK4A136_group、unclassified_f_Lachnospiraceae、Prevotellaceae_UCG-001、Alistipes;降低门水平上Actinobacteriota,科水平上Bifidobacteriaceae、Atopobiaceae、Clostridiaceae,属水平上Clostridium_sensu_stricto_1、Coriobacteriaceae_UCG-002、Bifidobacterium的相对丰度。结论半夏泻心汤可使Treg细胞相对数量升高、Th17细胞相对数量降低,以维持Th17/Treg细胞动态平衡;同时可降低有害菌Clostridium_sensu_stricto_1、Coriobacteriaceae_UCG-002的相对丰度,升高产短链脂肪酸类菌Lachnospiraceae_NK4A136_group、Prevotellaceae_UCG-001、unclassified_f_Lachnospiraceae等菌属的相对丰度,调控肠道微生物结构及动态平衡,从而发挥治疗UC的作用。