利用反义技术抑制大肠杆菌β-内酰胺酶基因表达的实验研究

摘要

目的 探讨利用反义表达质粒抑制细菌耐药基因表达的可行性.方法 根据GenBank中β-内酰胺酶TEM-1基因序列设计一对寡核苷酸引物,通过PCR扩增获取TEM-1基因,将其反向克隆入质粒pBK-CMV的多克隆位点构建反义表达质粒,将此反义表达质粒导入携带TEM-1型β-内酰胺酶的大肠杆菌,Western-blotting检测TEM-1表达情况.结果 成功构建了TEM-1基因的反义表达质粒,将其导入携带TEM-1型β-内酰胺酶的大肠杆菌后,Western-blotting检测发现TEM-1表达显著下调.结论 利用反义表达质粒可抑制大肠杆菌β-内酰胺酶TEM-1基因表达.