西红花对皮质酮诱导的PC12细胞损伤的保护作用研究

摘要

目的:优化构建抗抑郁研究的细胞实验模型,探讨西红花对皮质酮(CORT)诱导的PC12细胞损伤的保护作用及其相关机制.方法:观察不同浓度(0、125、250、500、750、1000μmol/L)皮质酮损伤PC12细胞24 h、36 h、48 h,CCK-8检测细胞活力,优化构建抑郁体外模型;不同浓度(2.5、5、10μg/mL)西红花预处理PC12细胞24 h,CCK-8检测细胞活力,观察西红花对CORT(500μmol/L)细胞损伤后的保护作用;检测细胞培养上清中的LDH活性,判断药物对细胞膜的保护作用;使用Annexin V-FITC/PI双染色法检测药物对CORT诱导的PC12细胞凋亡的保护作用;检测细胞裂解液中Caspase-3活性,判断药物作用与Caspase蛋白通路相关性.结果:CORT(0～1000μmol/L)作用PC12细胞,细胞存活率随药物浓度的增加而逐渐降低,依剂量呈线性关系;当西红花浓度>100μg/mL时,对PC12细胞存活的影响出现统计学意义;西红花预处理后,细胞存活率由模型组(53.31±4.18)％,上升为(57.46±2.76)％、(60.48±2.73)％、(61.99±3.05)％、(61.38±2.26)％、(59.46±2.41)％、(58.64±3.74)％;西红花预处理组LDH释放量显著低于模型组(P<0.05);西红花能够明显抑制CORT诱导的PC12细胞凋亡,西红花可抑制Caspase-3的表达.结论:西红花对CORT诱导的PC12细胞有一定保护作用.