毛囊bulge干细胞培养方法的比较研究

摘要

目的 通过对限定性角质形成细胞无血清培养基(DK-SFM)和3T3滋养层培养毛囊bulge干细胞的比较,寻求既能方便获得大量毛囊bulge干细胞,又能减少其分化的理想培养条件.方法 采用DK-SFM和313滋养层分别培养毛囊bulge干细胞,通过倒置显微镜观察毛囊bulge干细胞的形态,免疫荧光染色检测毛囊bulge干细胞的特异性标记细胞角蛋白19(CK19)和分化相关抗体群34(CD34)的表达鉴定毛囊bulge干细胞.通过比较2种方法培养的毛囊bulge干细胞的克隆形成率和CD34阳性率的差异,分别比较毛囊bulge干细胞的增殖能力和干细胞的数量,综合评估2种培养方法的优劣.结果 倒置显微镜观察2种培养方法所得毛囊bulge 干细胞均为铺路石状.免疫荧光染色检测2种培养方法培养的毛囊bulge干细胞CK19和CD34均呈阳性.DK-SFM和3T3滋养层培养的毛囊bulge干细胞克隆形成率分别为69.4%和62.2%.流式细胞仪检测DK-SFM培养的毛囊bulge干细胞中CD34阳性率为72.3%;3T3滋养层培养的毛囊bulge干细胞中CD34阳性率为34.7%.结论 DK-SFM和3T3滋养层培养作为毛囊bulge干细胞的2种培养方法,均可以获得未分化的毛囊bulge干细胞.用313滋养层培养毛囊bulge干细胞的方法比较复杂,且所获的细胞混杂有313细胞,但用此种方法可获得大量的毛囊bulge干细胞.用DK-SFM培养毛囊bulge干细胞方法简单,但细胞不易贴壁,且数量较少,但能有效分离出较纯的毛囊bulge 干细胞,保持较好的细胞活性.