小干扰RNA靶向抑制埃兹蛋白对肠癌细胞生物学行为的影响

摘要

目的:探讨细胞膜与细胞骨架连接的埃兹蛋白(Ezrin)对肠癌细胞生长和侵袭转移能力的影响.方法:选取肠癌细胞系(Lovo,SW480)作为研究材料,采用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)方法下调Ezrin的表达,分别通过实时荧光定量PCR和Western印迹法检测siRNA对Ezrin mRNA和蛋白表达水平的下调及下调作用随干扰时间的变化.根据Western 印迹法检测结果,选取Ezrin蛋白表达最低的时间点检测干扰后肠癌细胞生物学行为的改变.运用CCK-8法检测2株细胞干扰前后增殖能力的改变,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡,Transwell实验检测肠癌细胞侵袭和转移能力的变化.结果:实时荧光定量PCR和Western印迹结果显示,Ezrin siRNA对Ezrin mRNA和蛋白表达水平均有显著的下调作用.下调Ezrin蛋白后,2株肠癌细胞S期细胞比例略有下降,G1期细胞比例略有上升,与对照组比差异无统计学意义(P＞0.05);2株细胞凋亡指数增加,与对照组比差异有统计学意义(P＜0.05);肿瘤细胞的运动侵袭能力下降,穿过人工基底膜的细胞数量明显减少,与干扰前比差异有统计学意义(P＜0.01).结论:Ezrin在肠癌生长和侵袭转移过程中发挥重要作用,有可能成为抑制肠癌发生发展的新靶点.