人细胞色素p450　IA2基因的构建及其功能检测──该基因在啮齿类细胞中代谢

摘要

本文首先构建了含人类细胞色素ｐ４５０ＩＡ２ｃＤＮＡ的ｐＺｉｐ－ｐ４５０ＩＡ２的真核表达载体，并分别将其转染到Ｖ７９细胞和原代大鼠肝上皮细胞中．Ｎｏｒｔｈｃｒｎ杂交和免疫组化实验显示，Ｖ７９转染细胞中有人ｐ４５０ＩＡ２的ＲＮＡ和蛋白水平的表达。细胞毒实验和ＨＧＰＲＴ位点突变率检测结果证明，外源性ｐ４５０ＩＡ２基因可在Ｖ７９细胞中代谢活化黄曲霉毒素Ｂ１．转染有ｐＺｉｐ－ｐ４５０ＩＡ２质粒的原代大鼠肝细胞可代谢活化５ｎｇ／ｍｌ的黄曲霉毒素Ｂ１．本研究说明了人ｐ４５０ＩＡ２ｃＤＮＡ在ＭＭＬＶ的５′ＬＴＲ系统驱动下，可在体外啮齿类细胞中代谢活化黄曲霉毒素Ｂ１．它为ＡＦＢ１致癌机制的研究提供了一个新的、更为有效的途径。