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Ad.smac腺病毒的构建及其体外抗肿瘤效应的初步研究

         

摘要

目的 通过细菌内同源重组 ,制备表达全长smac基因的腺病毒 ,初步观察其体外对肿瘤细胞的杀伤作用。方法 构建含smac基因的腺病毒穿梭载体pAdTrack smac ,与骨架载体 pAdEasy1在细菌内重组为pAd .smac,经 2 93细胞包装为增殖缺陷性腺病毒。体外感染各种肿瘤细胞 ,用苔盼蓝拒染法观察其对肿瘤细胞的杀伤作用。结果 利用AdEasyTM 系统成功构建了Ad .smac及对照腺病毒Ad .GFP ,多种肿瘤细胞感染Ad .smac后均出现细胞凋亡现象 ,对肿瘤细胞的杀伤率达 30 %以上。结论 利用细菌内质粒同源重组法可快速简捷地制备表达外源基因的腺病毒 ,Ad .smac在体外通过诱导细胞凋亡而有效地杀伤肿瘤细胞 ,为Smac在肿瘤治疗的应用提供了一定的试验参考依据。

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