帕博西尼逆转人乳腺癌MCF-7/DOX细胞对多柔比星的耐药性

摘要

目的:研究细胞周期蛋白依赖性激酶4/6（cyclin-dependent protein kinase4/6,CDK4/6）抑制剂帕博西尼（palbociclib,PAL）对乳腺癌MCF-7/多柔比星（doxorubicin,DOX）细胞耐药性的逆转作用,并探讨药物转运体ATP结合盒蛋白B1（ATP binding cassette protein B1,ABCB1）在其中的作用机制。方法:采用CCK-8法检测PAL对亲本MCF-7及耐药MCF-7/DOX细胞DOX敏感性的影响;FCM法检测PAL对MCF-7及MCF-7/DOX细胞中DOX蓄积浓度的影响。构建稳定转入ABCB 1基因的MDCKⅡ细胞模型,采用药物跨膜转运实验检测PAL对药物转运体ABCB1介导的DOX外排功能的影响。实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测PAL对MCF-7及MCF-7/DOX细胞中ABCB1 mRNA及蛋白表达水平的影响。结果:0.2与0.4μmol/L的PAL可使DOX对MCF-7/DOX细胞的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)分别降低39%和51%（P值均＜0.05）,但对MCF-7细胞的IC50值无明显影响;0.4μmol/L PAL可使MCF-7/DOX细胞内DOX的蓄积浓度上调82%（P＜0.05）,但对MCF-7细胞中DOX的蓄积浓度无明显影响。PAL对ABCB1介导的DOX外排功能有明显抑制作用（P＜0.05）,但对MCF-7及MCF-7/DOX细胞中ABCB1 mRNA与蛋白的表达水平均没有明显的调节作用。结论:PAL可以通过抑制ABCB1转运体的功能而逆转乳腺癌MCF-7细胞DOX耐药性,提示PAL与DOX联用有望提高临床乳腺癌DOX的治疗效果,优化临床治疗方案。