不同报告时间结核分枝杆菌药物敏感性试验结果不一致的原因

摘要

目的探讨和分析使用绝对浓度法药物敏感性试验（简称“药敏试验”）时不同报告时间结果不一致的原因。方法2010年1—6月笔者收集采用绝对浓度法于37℃含INH的L-J培养基上培养4周时无菌落生长、时间延长至6周后才生长的13株菌株（含药培养基延迟生长菌株）。这些菌株来源于11例结核病患者（2例患者的菌株在低浓度和高浓度INH时均有菌落生长）；同时收集这11例结核病患者的临床敏感株作为对照菌株，共计24株菌株。进行比例法药敏试验和PCR菌种鉴定，并利用分枝杆菌散在分布重复单位（Mycobacterium interspersed repetitiveunit,MIRU）和结核分枝杆菌间隔区寡核苷酸分型（spoligotyping）技术进行基因分型，并选择对照菌株和含药培养基延迟生长菌株MRIU分型不同的3株菌株进行人工模拟不同浓度INH时混合的敏感菌株和耐药菌株进行绝对浓度法药敏试验，观察不同报告时间（4周和6周）的药敏试验结果。结果24株菌株经PCR鉴定均为结核分枝杆菌复合群。比例法药敏试验中13株含药培养基延迟生长菌株均对INH耐药，11株对照菌株均对INH敏感。3例患者的对照菌株和含药培养基延迟生长菌株Spoligotyping分型属于不同型别，分别为北京基因型和T2型、北京基因型和H3型、北京基因型和T2型。人工混合感染的3株菌株比例（临床株：H37Rv）小于1：128时可能会出现4周无菌落生长而6周有菌落生长的结果。结论对药物敏感性不同的结核分枝杆菌造成的混合感染，当耐药菌株的比例较低时，可能造成不同报告时间药敏试验结果不一致的情况。