高浓度大鼠肝实质细胞与非实质细胞共培养的细胞功能研究

摘要

目的:高浓度肝实质细胞与非实质细胞原代共培养,研究其功能活性.方法:应用原位胶原酶灌流法分离大鼠肝细胞,获得有活性的肝细胞,并应用高浓度实质和非实质肝细胞共培养的方法原代培养(共培养组),并以微囊肝细胞培养为对照组(微囊组)进行了比较.结果:两组均维持白蛋白分泌、尿素合成功能7天;共培养组的白蛋白分泌与微囊组一样为下降趋势,共培养组从(0.870±0.102)降至(0.492±0.040)g@L-1@10-6cells@24h-1,微囊组从(1.147±0.099)降至(0.375±0.012)g@L-1@10-5cells@24h-1;共培养组的肝细胞第4天后维持在一个较稳定的水平,而微囊组肝细胞前3天明显高于共培养组,而后两天显著低于共培养组(P＜0.05).共培养组的尿素合成功能,由(4.50±0.56)降至(4.37±0.19)μmol@L-1@10-5cells@90min-1,微囊组由(5.42±0.81)降至(3.60±0.33)μmol@L-1@10-6cells@90main-1,前3天微囊组高于共培养组,后2天共培养组明显高于微囊组(P＜0.05).共培养2～7天肝细胞的对氨基苯甲酸(PABA)浓度稳定在7.2～9.9mg/L@10-6cells@24h-1.结论:高浓度肝实质细胞与非实质细胞共培养,可使肝细胞的特异性功能维持7 d,而且较微囊肝细胞更适合应用于中空纤维舱型生物人工肝.