异甘草素对低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞增生的抑制作用研究

摘要

目的研究异甘草素对低氧诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)增生的影响及作用机制。方法2017年3—6月,通过α-actin免疫组化染色对原代大鼠PASMCs进行鉴定,并取3~7代用于细胞实验;将细胞分成常氧组、低氧组、低氧+10μmol/L异甘草素组、低氧+25μmol/L异甘草素组、低氧+50μmol/L异甘草素组、低氧+100μmol/L异甘草素组,在常氧(21%O2)或低氧(3%O2)条件下培养24 h;CCK-8染色法检测异甘草素对低氧诱导的PASMCs增生的影响;DCFH-DA荧光探针检测异甘草素对低氧诱导的PASMCs活性氧(ROS)产生的影响;qRT-PCR检测异甘草素对低氧诱导的PASMCs NOX4 mRNA表达的影响。结果低氧组PASMCs的吸光度(OD)值(0.86±0.05)显著高于常氧组(0.57±0.02),低氧+25μmol/L异甘草素组OD值(0.75±0.02)较低氧组显著降低,而且随着给予异甘草素浓度的增加OD值呈明显下降趋势;DCFH-DA结果显示,低氧组PASMCs ROS的产生(13.36±0.36)%显著高于常氧组(3.05±0.18)%,低氧+25μmol/L异甘草素组ROS的产生(9.79±0.26)%较低氧组显著降低,而且随着给予异甘草素浓度的增加ROS的产生呈明显下降趋势;qRT-PCR结果显示,低氧组PASMCs的NOX4 mRNA表达量是常氧组的2.15倍,低氧+25μmol/L异甘草素组NOX4 mRNA表达量较低氧组显著降低,而且随着给予异甘草素浓度的增加NOX4 mRNA表达量呈明显下降趋势。结论异甘草素抑制低氧诱导的PASMCs增生,可能与抑制低氧诱导的PASMCs ROS的产生有关。