人血管性血友病因子A1区单克隆抗体的研制及其生物学功能的初步研究

摘要

目的 研制人血管性血友病因子(vWF)A1区的单克隆抗体及其生物学特性的鉴定.方法 采用基因重组技术体外表达人vWF A1区蛋白(rv, WF-A1),以rvWF-A1免疫Balb/c小鼠,通过细胞融合,HAT选择性培养,用ELISA筛选阳性杂交瘤细胞.采用Western blot和免疫组织化学方法进行单抗鉴定.结果 构建了rvWF-A1表达载体pQE30-vWF-A1.rvWF-A1在大肠杆菌M15中稳定表达.通过融合、筛选获得两株阳性杂交瘤细胞,命名为SZ-129和SZ-130.其分泌的抗体能特异性地与rvWF-A1和人血浆中vWF结合.结论 表达了rvWF-A1,并制备了具有潜在抗血栓作用的vWF-A1单克隆抗体SZ-129和SZ-130.