人类β3-N-乙酰氨基葡萄糖基(β3半乳糖)转移酶β3GnT8/ GalT7的抗体制备、免疫组化分析及其亚细胞定位

摘要

目的 探讨β3GnT8(β3GalT7,AY277592,EC2.4.1.-)基因(人类β3-糖基转移酶家族中的一个新成员)的功能.方法 原核表达该蛋白,以纯化的蛋白免疫新西兰大白兔,制备多克降抗血清;以Western blot和免疫组化分析其在多种组织细胞的表达情况;并通过荧光免疫细胞化学进行亚细胞定位.结果 获得了较纯的表达蛋白和高效价、高特异性的抗血清,片且发现该蛋白大部分位于核膜周围的胞浆中;免疫组化分析显示肿瘤细胞和组织中该酶有较高的表达,与正常组织比较具有一定的差异性.结论 该实验获得了β3GnT8/β3GalT7基因的蛋白质和相应抗体,并且对该蛋白进行了亚细胞定位,为对其生物学功能的进一步研究奠定了基础.