荷花花蕾cDNA文库构建及质量评价

摘要

为理解荷花Nelumbo nucifera花器官转录组表达情况,分别选取不同花型的代表品种'洪湖红莲'Nelumbo nucifera'Honghu Honglian'(单瓣)、'唐招提寺莲'N.nucifera'Tangzhaotisi Lian'(重瓣)和'千瓣莲'N.nucifera'Qianban Lian'(千瓣及全重瓣)的花蕾为材料分离mRNA,利用SMART技术合成双链cDNA,经限制性内切酶SfiI酶切后回收去掉接头和500 bp以下片段的cDNA.将cDNA与pUC19载体连接,构建荷花花蕾cDNA文库.经检测,该文库容量为1.12×106 pfu·mL-1,插入片段大小集中在500~2000 bp,重组率为95%.该文库的成功构建为荷花花蕾期转录组数据的开发及其花器官发育相关基因的功能研究奠定了分子基础.