氯胺酮对NMDA诱导大鼠脊髓背角星形胶质细胞损伤的保护作用

摘要

目的观察氯胺酮对N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体过度激活诱导大鼠脊髓背角星形胶质细胞凋亡影响,并探讨其可能的作用机制.方法取新生2～3 d wistar大鼠T11-L6脊髓背角星形胶质细胞原代纯化培养,GFAP鉴定星形胶质细胞纯度达98%后用于实验.将细胞随机分6组:对照组(C组),NMDA组(N组),氯胺酮组(K组)和三种不同浓度氯胺酮加NMDA组(0.1,0.5,1 mmol/L,标记为NK1～NK3组),再培养24 h后检测SOD活性和MDA含量,免疫组化HE复染观察Bcl-2蛋白和形态学变化,流式细胞仪检测星形胶质细胞凋亡率.结果N组细胞发生了大量凋亡,SOD活性显著降低,MDA含量明显增加,Bcl-2蛋白表达不明显;NK3组细胞凋亡被显著抑制,Bcl-2蛋白强阳性表达,SOD活性明显增加和MDA含量低.结论NMDA受体过度激活可诱导大鼠脊髓背角星形胶质细胞大量凋亡,适量氯胺酮显著抑制了细胞凋亡,其机制可能是增强了星形胶质细胞Bcl-2蛋白表达,同时抑制了自由基的产生和增强了SOD活性.