槲皮素对K-Ras突变型结直肠癌细胞的特异性杀伤效应

摘要

目的:研究植物源性黄酮类化合物单体槲皮素对K-Ras突变型结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)细胞的杀伤作用。方法:体外培养人结直肠癌细胞K-Ras突变型CRC细胞系(DLD1K-RAS G13D)和K-Ras野生型CRC细胞系(DLD1K-RAS WT),分别给予50和100μM的槲皮素处理24h,采用MTT和集落形成实验,观察细胞增殖情况;以流式细胞术检测细胞凋亡;Western blotting测定DLD1K-RAS G13D和DLD1K-RASWT的Ras信号通路相关蛋白AKT、JNK、MEK和ERK的表达。结果:槲皮素(50-100μM)处理24h后,与DLD1K-RASWT相比,突变型细胞DLD1K-RAS G13D增殖和集落形成明显降低(P<0.05)。槲皮素处理后,cleaved-PARP和caspase-3活化明显增强;磷酸化的AKT(p-AKT)随槲皮素浓度增加表达降低,在KRAS突变细胞中上述变化更加明显。结论:槲皮素通过caspase依赖凋亡通路诱导K-Ras突变细胞凋亡,并通过抑制AKT信号通路的活化,特异性抑制K-Ras突变细胞的增殖和集落形成。