大鼠原代肝细胞的培养及鉴定

摘要

目的:探讨体外大鼠肝细胞的分离培养及纯化的方法.方法:采用胶原酶Ⅳ消化组织块法分离新生大鼠肝细胞,对大鼠肝细胞进行纯化、培养,并采用免疫组织化学方法对其进行鉴定.结果:培养24 h,有部分细胞贴壁,48 h有大量细胞贴壁,但含有较多杂细胞.经过4～5次传代后,细胞形态一致,可见许多双核细胞和多核细胞.采用抗大鼠细胞角蛋白(ck-18)的特异抗体进行免疫细胞化学鉴定,经SP染色DAB显色后,阳性着色部位在胞浆呈棕黄色颗粒,阴性对照未见着色.结论:成功地体外培养了大鼠肝细胞并对其进行了鉴定,为进一步的实验研究奠定了基础.