再改良的悬滴培养法及其在鸡胚背根节体外培养中的应用

摘要

作者应用再改良的悬滴培养方法，培养鸡胚背根节。将Hamburger35期鸡胚腰段背很节分别种植于涂有鼠尾胶原的48孔组织培养板孔中，每扎加入培养液100VI，翻转培养板，使背根节和培养液滴悬挂在培养孔内。再将培养板置入加有一定量Hanks平＠I盐溶液的玻璃缸中，密封缸周绿，将其放入37C恒温箱中培养。利用NaHCO。和H对的作用能释放CO。以及水份受热蒸发产生相对湿度，从而在缸内建立相当CO。孵箱的细胞生长环境。本方法是在本研究组改良悬滴培养法的基础上作了进一步改进，改进后的方法操作更为简便，更能节约大量人力、物力和时间，并且由于每批各实验组间所培养的背根节都生长在同一培养板的环境中，保证了实验的同步及培养条件的完全一致。我们应用本法进行了二十余次实验，共种植了1000余个背根节，对经凝胶过滤层析和高效液相色谱技术分离的备用背根描脊髓背角提取液各组份进行了生物学活性检测，确定了有活性的组份及其有效作用的最低剂量。结果表明本方法是体外培养鸡胚背报节的一种简便可靠、省时、省力的好方法。