大鼠交泰丸含药血清预处理对人脑胶质细胞氧化损伤的改善作用及其分子机制

摘要

目的观察大鼠交泰丸含药血清预处理对人脑胶质细胞(HEB)氧化损伤的改善作用并探讨其分子机制。方法SD大鼠随机分为两部分,分别通过肉桂及黄连水提物灌胃、同体积蒸馏水灌胃制备交泰丸含药血清及空白血清,将DMEM培养基与血清配制成10%完全培养基。将HEB分为对照组、模型组及交泰丸组,对照组及模型组加入空白血清培养基、交泰丸组加入含药血清培养基。培养24 h后,交泰丸组及模型组使用过氧化氢处理建立HEB氧化损伤模型,对照组使用等体积PBS处理。采用β-半乳糖苷酶染色法观察各组细胞氧化损伤比例,CCK-8法观察细胞活力,流式细胞术观察细胞凋亡率,活性氧荧光染色法观察细胞氧化应激水平,qRT-PCR法检测细胞衰老相关基因沉默信息调节因子1(SIRT1)、趋化因子联接因子1(CXCL1)、叉头框转录因子O亚族1(FOXO1)、P16、白细胞介素1α(IL-1α)、胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)、IL-6 mRNA表达。结果细胞氧化损伤比例模型组>交泰丸组>对照组,细胞活力对照组>交泰丸组>模型组,细胞凋亡率模型组>交泰丸组>对照组(P均<0.05)。对照组细胞核膜边界清晰,ROS荧光强度低;模型组细胞核膜发生部分裂解,ROS荧光强度增强;交泰丸组细胞膜及核膜结构较模型组更加完整,ROS荧光强度降低。与对照组比较,模型组SIRT1、FOXO1 mRNA表达下降,CXCL1 mRNA表达上升;与模型组比较,交泰丸组SIRT1、FOXO1 mRNA表达下降(P均<0.05),三组其他基因比较差异均无统计学意义。结论大鼠交泰丸含药血清预处理可抑制过氧化氢诱导的HEB氧化损伤,其机制可能与增强细胞活力、抗细胞凋亡、减少细胞氧化应激水平以及抗炎症有关。