幽门螺杆菌感染小鼠胃内菌群、短链脂肪酸变化及丁酸盐对胃癌细胞增殖迁移的影响

摘要

目的观察幽门螺杆菌感染小鼠胃内菌群、短链脂肪酸的变化,以及短链脂肪酸之一的丁酸盐对胃癌细胞增殖、迁移的影响。方法将C57BL/6雌性小鼠24只随机分为幽门螺杆菌组和对照组,每组12只。幽门螺杆菌组给予H.pylori SS1菌液灌胃,对照组给予布氏肉汤灌胃;隔日1次,共3次。两组灌胃后6、12个月各取6只小鼠,处死后取胃组织,采用real-time PCR法检测两组灌胃12个月胃组织常见微生物菌群丰度,高效液相色谱法检测两组灌胃后6、12个月胃组织短链脂肪酸(乙酸、丙酸、丁酸)水平。将胃癌细胞系AGS随机分为丁酸盐组和空白对照组,丁酸盐组加入不同浓度丁酸盐,空白对照组未予特殊处理。采用CCK-8法检测两组培养0、12、24、48 h的光密度(OD)值,采用Transwell侵袭实验检测两组进入下室的细胞数。结果幽门螺杆菌组胃组织内的微生物菌群按照丰度排序依次为幽门螺旋杆菌、柔嫩梭菌、拟球梭菌、乳酸菌、普氏菌,对照组依次为拟球梭菌、乳酸菌、肠杆菌、柔嫩梭菌,其中柔嫩梭菌、拟球梭菌为丁酸盐产生菌。幽门螺杆菌组灌胃后6个月胃组织丁酸水平高于对照组(P<0.05)。与灌胃后6个月比较,幽门螺杆菌组与对照组灌胃后12个月胃组织乙酸、丙酸、丁酸水平均升高,且幽门螺杆菌组升高更明显(P均<0.05)。与对照组同时间点比较,加入不同浓度(0.5、1.0、2.5 mmol/L)丁酸盐的丁酸盐组作用24、48 h的OD值均升高(P均<0.05);相同作用时间下,丁酸盐组OD值随着丁酸盐浓度的升高而升高,以2.5 mmol/L作用48 h时的OD值最高(P均<0.05)。丁酸盐组(丁酸盐终浓度为2.5 mmol/L)与空白对照组进入下室的细胞数分别为(221±32)、(85±14)个,两组比较P<0.05。结论幽门螺杆菌感染可导致小鼠胃组织中丁酸水平及产丁酸盐的菌群丰度升高,而丁酸盐可促进胃癌细胞的增殖和迁移。