ID3过表达对肝细胞癌多柔比星化疗敏感性的影响及其机制

摘要

目的 探讨分化抑制因子3(ID3)对肝细胞癌(HCC)多柔比星(DOX)化疗敏感性的影响及其可能的作用机制.方法 体外培养肝癌HepG2细胞、肝癌阿霉素(ADM)耐药HepG2细胞(HepG2/ADM细胞),采用qRT-PCR法检测两种细胞ID3 mRNA表达.选择传2代、对数生长期、生长状态良好的HepG2/ADM细胞,随机分为对照组和实验组,分别转染阴性对照慢病毒质粒、ID3过表达慢病毒质粒.转染24 h,收集细胞,采用qRT-PCR法检测ID3 mRNA表达;分别加入不同浓度DOX处理,检测DOX的IC50值;采用TUNEL凋亡染色法、流式细胞术检测细胞凋亡率,采用Western blotting法检测PI3K/AKT信号通路相关蛋白(pPI3K、pAKT、Bcl-2)表达.结果 HepG2/ADM细胞ID3 mRNA相对表达量为0.24±0.04,HepG2细胞为1.00±0.11,两者比较P<0.05.实验组ID3 mRNA相对表达量为13.54±2.33,对照组为1.00±0.00,两组比较P<0.05.实验组DOX的IC50值为(0.12±0.03)μg/mL,对照组为(0.25±0.04)μg/mL,两组比较P<0.05.实验组两种检测方法的细胞凋亡率均明显高于对照组(P均<0.05).实验组pPI3K、pAKT、Bcl-2蛋白相对表达量均明显低于对照组(P均<0.05).结论 ID3过表达可提高HCC对DOX的化疗敏感性,其机制与抑制PI3K/AKT信号通路相关蛋白表达有关.