反义端粒酶基因与顺铂诱导原代胃癌细胞凋亡作用的研究

摘要

目的探讨端粒酶反义寡核苷酸(PS-ASODN)与顺铂(DDP)联合应用对原代胃癌细胞凋亡作用的影响.方法常规组织块培养法进行胃癌细胞原代纯化培养,取第3代对数生长期细胞分六组进行实验.其中四组在培养24小时及48小时分别加入相同剂量的培养液,终浓度为PS-ASODN3μM,N-ASODN3μM,DDP2.0μg/ml.作用24小时后分别在PS-ASODN 组及N-ASODN组加入终浓度为2.0μg/ml的DDP;分别于培养后24、48、72及96小时收集各组细胞.以台盼蓝拒染法计算各组细胞生长抑制率,观察PS-ASODN联合DDP对原代胃癌细胞生长的影响;流式细胞学观察细胞凋亡率及细胞周期变化.结果终浓度为3μM的PS-ASODN作用于原代胃癌细胞24小时后加入DDP 2.0μg/ml,能明显抑制胃癌细胞增殖,流式细胞学可检测到凋亡峰,细胞受阻于G0/G1期,作用48及72小时的凋亡细胞百分率(35.1%、45.7%)明显高于N-ASODN组、PS-ASODN组、DDP组及N-ASODN+DDP组,差异有显著性(P＜0.05).其作用呈时间依赖性及序列特异性.结论以端粒酶RNA模板区为靶点的PS-ASODN可促进DDP诱导的胃癌细胞凋亡,对胃癌具有治疗价值.