端粒酶反义基因对紫杉醇诱导原代胃癌细胞凋亡的增敏作用

摘要

目的:探讨端粒酶反义寡核苷酸(PS-ASODN)与紫杉醇(TAXOL)联合应用对原代胃癌细胞凋亡作用的影响.方法:常规组织块培养法进行胃癌细胞原代纯化培养,取第3代对数生长期细胞进行实验.各组在培养24h及48h分别加入相同剂量的培养液;终浓度:3μM的PS-ASODN,3μM的N-ASODN,1.0μM的TAXOL.作用24h后再分别在PS-ASODN组及N-ASODN组加入终浓度为1.0μM的TAXOL;分别于培养后24,48,72,96h收集各组细胞.以台盼蓝拒染法计算各组细胞生长抑制率,观察PS-ASODN联合TAXOL对原代胃癌细胞生长的影响;流式细胞学观察细胞凋亡率及细胞周期变化.结果:终浓度为3μM的PS-ASODN作用于原代胃癌细胞24h后加入TAXOL1.0μM,能明显抑制胃癌细胞增殖,同时流式细胞学检测到凋亡峰,细胞受阻于G2/ M期,作用48,72,96h的凋亡细胞百分率(34.8%,44.6%及50.6%)明显高于TAXOL组及N-ASODN+TAXOL组,差异有统计学意义(P＜0.05),其作用呈时间依赖性及序列特异性.结论:以端粒酶RNA模板区为靶点的PS-ASODN可促进TAXOL诱导的胃癌细胞凋亡,对胃癌具有重要治疗价值.