端粒酶hTERT基因反义核酸对TNF-α诱导前列腺癌PC3细胞凋亡的影响

摘要

目的:探讨hTERT基因的两端部分硫代修饰反义寡核苷酸(AS PS-ODN)抑制前列腺癌细胞PC3端粒酶活性后,肿瘤坏死因子α(TNF-α)对PC3凋亡的增敏作用。方法:采用端粒重复序列扩增法及TRAP-PCR-ELISA法检测前列腺癌细胞的端粒酶活性;采用MTT比色试验观察hTERTAS PS-ODN与TNF-α共同作用对前列腺癌细胞PC3生长活力的影响;倒置显微镜观察凋亡细胞的形态变化;通过流式细胞仪测定凋亡细胞的百分率。结果:hTERTAS PS-ODN作用于PC3细胞48h,其端粒酶活性下降,作用72h,其端粒酶活性受到抑制,与正义寡核苷酸组及空白对照组相比差异有显著性(P<0.05)。hTERTAS PS-ODN作用于PC3细胞后加入TNF-α作用48h,PC3细胞的抑制率与对照组、S PS-ODN组、AS PS-ODN组、TNF-α组及S PS-ODN+TNF-α组相比有统计学差异(P<0.01)。hTERTAS PS-ODN作用于PC3细胞后加入TNF-α作用48h,细胞出现典型的凋亡形态变化。hTERT ASPS-ODN作用于PC3细胞后加入4μg/ml TNF-α作用48h,凋亡细胞的百分率分别与对照组、S PS-ODN组、AS PS-ODN组、TNF-α组及S PS-ODN+TNF-α组相比差异有显著性(P<0.05)。结论:hTERTAS PS-ODN能降低前列腺癌细胞PC3端粒酶活性;hTERT基因反义核酸对TNF-α诱导前列腺癌细胞PC3凋亡有增敏作用。