Survivin反义寡核苷酸诱导胃癌原代细胞凋亡的实验研究

摘要

目的:探讨survivin反义寡核苷酸对人胃癌原代细胞凋亡的影响，为胃癌的靶向治疗提供实验依据。 方法:人胃癌实体瘤新鲜标本，剪切为1mm<'3>大小的组织块，用鼠尾胶原为生长介质，RPMI 1640为基础培养液进行培养。收集培养至第3代的胃癌原代细胞，分为4组：空白对照组，脂质体组，正义寡核苷酸组，反义寡核苷酸转染组。人工合成的survivin反义寡核苷酸用脂质体介导转染胃癌原代细胞，48小时后，用倒置显微镜观察肿瘤细胞的形态改变，Western blot检测survivin蛋白的表达，流式细胞术检测细胞的凋亡，免疫细胞化学法显示各组肿瘤细胞增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况，并对结果进行统计学分析。 结果:用脂质体介导survivin反义寡核苷酸(survivin-ASODN)转染胃癌原代细胞，48小时后，肿瘤细胞体积变小，核固缩模糊，细胞碎裂；Western blot检测到survivin蛋白量下降；流式细胞仪观察到肿瘤细胞DNA主峰左侧出现了凋亡峰，肿瘤细胞的凋亡率增高；免疫细胞化学显示PCNA表达率下降。Survivin反义寡核苷酸组肿瘤细胞survivin蛋白的表达量，肿瘤细胞的凋亡率以及肿瘤细胞PCNA的表达率，与其他各组相比，其差异有统计学意义(P<0.05)，而空白对照组、脂质体组、正义寡核苷酸组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。 结论:survivin反义寡核苷酸在脂质体包裹介导下转染人胃癌原代细胞，可以诱导肿瘤细胞发生凋亡，抑制细胞生长，为胃癌的靶向治疗提供了实验依据。转染胃癌原代细胞较转染胃癌细胞系实验进一步验证了survivin作为抗癌治疗标靶的可靠性。

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survivin与癌症治疗综述

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