抗CD3-抗CD20微型双功能抗体的优化表达及其生物活性分析

摘要

目的 探讨抗CD3-抗CD20微型双功能抗体的优化表达条件及其生物学活性,为细胞免疫治疗提供依据.方法 在不同培养基及不同浓度诱导剂异丙基- β-D -硫代半乳糖苷(IPTG)中表达抗CD3-抗CD20微型双功能抗体,用亲和层析法纯化该产物并经SDS-PAGE 和Western Blot鉴定,用流式细胞仪(FACS)法测定其双功能活性.结果 IPTG浓度为400 μM,培养基选用2YT时目的蛋白实现可溶性表达,培养表达量可达3.5 mg/L,其纯度较高,且与Jurkat和Daudi细胞均具有很好的结合活性.结论 本研究优化了抗CD3-抗CD20微型双功能抗体表达条件,且表达产物具有双功能活性;此为细胞免疫治疗奠定了基础.