不同浓度5-氮胞苷对小鼠骨髓间充质干细胞的诱导作用

摘要

目的 探讨5-氮胞苷(5-aza)对小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的最佳诱导浓度.方法 分离2周龄小鼠胫骨、股骨,冲洗出骨髓,采用Ficoll淋巴细胞分离液密度梯度离心和贴壁培养的方法获得MSCs.取传第2代MSCs培养48 h后分别加入3、5 、10、20、50 μmol/L 5-aza进行诱导,设为3、5 、10、20、50 μmol/L组.继续培养3周后观察细胞形态变化,免疫细胞化学法检测心肌特异性蛋白α-actin表达.结果 5-aza 3、5 μmol/L组α-actin阳性率分别为0.88%±0.52%、2.61%±0.96%,两组细胞形态均无明显改变;10 μmol/L组可见细胞突起回缩,α-actin呈强阳性表达,阳性率为30.57%±1.82%;20、50 μmol/L组细胞已脱落.结论 MSCs经5-aza体外诱导分化,可获得形态类似、表达心肌特异性蛋白的心肌样细胞,且以10 μmol/L浓度诱导作用最佳.