pGenesil-2.1-iASPP-shRNA质粒的构建及转染

摘要

目的 构建针对iASPP基因的短发卡RNA干扰(iASPP-shRNA)质粒,并转染胃癌细胞AGS(p53野生型).方法 以iASPP为靶基因设计两条带有短发卡结构的寡核苷酸序列,连接到pGenesil-2.1载体,转化感受态大肠杆菌DH5a,提取质粒转染胃癌细胞并培养形成稳定的细胞系,PCR检测转染AGS细胞中的iASPP基因.结果 构建的pGenesil-2.1-iASPP-shRNA质粒测序证实iASPP基因序列完全正确,该质粒转染AGS细胞后,其iASPP基因表达受抑制.结论 成功构建了pGenesil-2.1-iASPP-shRNA质粒,并可成功转染AGS细胞而抑制其iASPP基因的表达.