1-磷酸鞘氨醇对肺泡Ⅱ型上皮细胞上皮间质转化的影响

摘要

目的 观察1-磷酸鞘氨醇(S1P)对肺泡Ⅱ型上皮细胞发生上皮间质转化(EMT)的影响.方法 体外培养肺泡Ⅱ型上皮细胞A549,以不同浓度(0、10-8、10-7、10-6、10-5mol/L) S1P作用72 h后,倒置显微镜观察细胞形态变化;以10-5 mol/L S1P作用A549细胞,不同时点(0、12、24、48、72 h)收集细胞,采用Western blot法和RT-PCR法分别测定EMT相关蛋白及mRNA.以0 mol/L S1P或S1P作用Oh为对照组,其他浓度和时点为观察组.结果 观察组不同浓度S1P孵育后,A549细胞在10-7 mol/L时,开始出现类似成纤维细胞形态学改变,细胞呈梭形、纺锤形,且细胞间连接疏松,间隙增大;对照组细胞呈典型的上皮细胞形态,细胞间连接紧密,呈类圆形.与对照组相比,观察组随着作用时间的延长,上皮标记物E-钙黏素蛋白及mRNA表达下调,间质标记蛋白纤维连接蛋白、平滑肌肌动蛋白及mRNA表达上调,均在作用48、72 h差异具有统计学意义(P均＜0.05或0.01).结论 S1P分子可诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞发生EMT,在肺间质纤维化形成过程中具有一定促进作用.