瞬时过表达MnERF2基因对桑树耐盐性的影响

摘要

为探明桑树AP2/ERF转录因子MnERF2基因对桑树耐盐胁迫能力的影响,利用构建好的植物过表达和抑制表达载体瞬时转化桑树,并比较分析NaCl胁迫前后瞬时转化桑树中的活性氧(ROS)含量、抗氧化酶活性、抗氧化物质含量以及抗氧化酶基因的表达量,以综合评定MnERF2基因的耐盐功能。通过荧光定量RT-PCR对盐胁迫后MnERF2表达量的分析显示,成功获得MnERF2基因瞬时过表达(OE)、抑制表达(RNAi)转基因植株。进一步的生理指标分析结果显示,不同时间盐胁迫下瞬时过表达MnERF2植株中的ROS(O_(2)^(-)·、H_(2)O_(2)、·OH)和丙二醛(MDA)含量明显低于对照和RNAi株系,过氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)活性以及抗坏血酸(AsA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、脯氨酸含量高于对照和RNAi株系,且48h处理下SOD、POD、CAT三种酶基因表达量显著高于对照和RNAi株系。说明MnERF2基因响应桑树的盐胁迫,通过提高植株的保护酶活性和抗氧化物质含量、降低活性氧氧化及细胞损伤程度提高桑树的耐盐能力。