ERK2-siRNA质粒的构建及其诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡的实验研究

摘要

目的:合成、克隆、筛选ERK2-siRNA干扰片段,构建含有ERK2-siRNA的骨架质粒.明确其抑制基因ERK2在HeLa细胞中表达及诱导HeLa细胞凋亡.方法:利用RNA干扰方法构建真核表达载体pGenesil1.1-ERK2-siRNA.体外培养人宫颈癌HeLa细胞,利用脂质体法将该质粒转染HeLa细胞.利用western blot法检测该质粒转染后ERK2基因的表达,筛选最佳干扰质粒.通过TUNEL法HeLa细胞凋亡染色及HeLa细胞Caspase-3表达的免疫组化染色检测其诱导HeLa细胞的凋亡.结果:成功构建及筛选出ERK2-siRNA质粒.该质粒在体外能够有效诱导HeLa细胞凋亡.结论:干扰ERK2基因的表达能够诱导HeLa细胞的凋亡,应用该方法可以为宫颈癌的治疗提供新思路.