胚胎干细胞途径的基因打靶技术

摘要

简要介绍了转基因技术、基因打靶以及胚胎干细胞的性质特点,详细阐述了胚胎干细胞途径的基因打靶技术的原理、方法及应用.胚胎干细胞途径的基因打靶包括以下几个步骤:选择合适的ES细胞系、构建外源DNA片段打靶载体、目的基因筛选、ES细胞的转化、ES细胞的药物筛选、抗性克隆的分离与扩增、PCR与SOUTHERN印记、基因打靶小鼠的获得-嵌合体制作.以期为胚胎干细胞和基因打靶技术的进一步研究提供方法.