应用小鼠胚胎肢芽培养方法评价氟的致畸性及其对肢芽软骨细胞胶原合成的影响

摘要

目的应用小鼠胚胎肢芽培养评价氟化物的致畸性并探讨其发生机理.方法选用妊娠第12天龄小鼠胚胎前肢芽在BGJb培养基进行6天连续培养.NaF用双蒸水配成所需浓度,肢芽培养时用针头滤器过滤除菌,加入培养基.本实验共设7个组,即空白对照组,5个染毒组,F浓度分别为:5.0、10.0、20.0、30.0、40.0μg/ml,另设一组阳性对照.剂量用培养基中氟离子的终浓度表示.阳性对照物用VitA.观察软骨原基的发育和分化,用Neubert评分系统给予评分.应用[<'3>H]-脯氨酸标记蛋白进行胶原含量的测定.结果随着氟浓度增高,肢芽各种软骨发育分化越差,评分越低,呈一定的剂量～效应关系.氟在20μg/ml以上时显示了致畸性,软骨畸形表现为缺失和形态改变.同时各染毒组放射计数与对照比较呈现出显著性差异(P<0.05,P<0.01),表明氟抑制了肢芽细胞胶原蛋白的合成.结论氟能够抑制胚胎肢芽胶原蛋白合成和软骨细胞分化发育,是潜在的致畸物.