耐盐基因Bet-A转化小黑杨的研究

摘要

本研究建立了小黑杨(Populus simonii×P.rugra)组培再生体系,确定小黑杨芽分化最适宜培养基、生根培养基,然后进行卡那霉素敏感性试验.以小黑杨无菌苗叶片为转化受体材料,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefacien)介导法将外源基因Bet-A(编码胆碱脱氢酶,催化胆碱生成甘氨酸甜菜碱)导入小黑杨(P simonii×P.nigra).对获得的11株转化苗进行了PCR扩增检测和斑点杂交检测,其中7株获得了1.7Kb特异性扩增条带和杂交斑点,表现为阳性.从斑点杂交检测的转化苗中选取3株杂交斑点明亮的转化子进行Southern印迹杂交分析,结果证实外源基因已整合到小黑杨基因组中.