甜菜夜蛾多酚氧化酶的特性及其对曲酸等抑制剂的反应

摘要

以甜菜夜蛾5龄幼虫为试材提取多酚氧化酶,经40%饱和度硫酸铵沉淀、Sephadex G-100凝胶过滤等步骤部分纯化后,总活力回收率为26.67%,酶活力提高8.56倍.以邻苯二酚为底物,测得该酶反应的最佳条件:pH=6.5,T=40℃,米氏常数Km=10.73 mmol·L-1.研究了曲酸、香草酸等5种化合物对该酶活力的影响,结果表明,除芦丁外均对其酶活力产生一定的抑制作用,其中以曲酸抑制力最强,其抑制中浓度I50为36.71 μg·ml-1.曲酸对该酶活力的抑制动力学研究表明,该化合物是典型的可逆竞争型抑制剂,抑制常数Ki=3.55 μg·ml-1.