鸭leptin基因在大肠杆菌中的融合表达及生物学活性分析

摘要

[目的]研究鸭leptin在体外高效表达特点,探讨表达产物的生物学活性及其功能.[方法]构建重组鸭leptin基因原核表达菌株,重组菌株经不同浓度IPTG和不同时间诱导后,对表达蛋白进行提取、纯化、复性和浓缩,经注射昆明小鼠后,对小鼠的体重﹑采食量和体脂含量进行分析.[结果]鸭leptin在大肠杆菌中实现了高效特异性融合表达,融合蛋白分子量约为20 kD,其中16 kD为鸭leptin基因表达产物,目的蛋白在0.2 mmol·L-1 IPTG的诱导下,表达量最高约占菌体总蛋白的57%.重组蛋白纯化﹑复性﹑浓缩后,能够明显降低小鼠摄食量、体重和体脂含量.[结论]鸭leptin基因在大肠杆菌中进行了高效融合表达,表达产物具有明显的生物学活性.